Expresión del sistema de las taquicininas en células de la granulosa de origen humano.
Objetivos
El objetivo de este estudio es analizar la expresión de la sustancia P (SP), la hemocinina-1 (HK-1) y los receptores NK1R y NK2R a nivel de ARNm y proteína en células de la granulosa humanas.
Metodología
Se reclutaron 33 donantes de ovocitos entre enero de 2012 y diciembre de 2013. Las muestras de líquido folicular que contenían las células de la granulosa mural (CGM) y los complejos cúmulo-ovocito se obtuvieron mediante punción transvaginal guiada por ecografía. Las células del cúmulo (CCs) que rodean al ovocito se retiraron mediante corte con agujas, tratamiento con hialuronidasa y decumulación con micropipetas. Se emplearon técnicas de PCR cuantitativa en tiempo real, inmunohistoquímica y western blot para analizar la expresión de SP, HK-1, NK1R y NK2R.
Resultados
SP, HK-1, NK1R y NK2R se expresan a nivel de ARNm y de proteína tanto en CGMs como en CCs. En relación al receptor NK1R, únicamente se detectó el ARNm y la proteína correspondiente a la isoforma truncada (NK1R-T). Los niveles de ARNm de NK1R-T fueron más altos en CGMs que en CCs de las mismas donantes; mientras que los niveles de NK2R, tanto a nivel de ARNm como de proteína, eran mayores en CGMs que en CCs.
Conclusiones
Todos los miembros conocidos del sistema de las taquicininas se expresan en el ovario humano, tanto en células de la granulosa mural como en células del cúmulo.
Bibliografía
Almeida TA, Rojo J, Nieto PM, Pinto FM, Hernandez M, Martin JD, Candenas ML. Tachykinins and tachykinin receptors: structure and activity relationships. Curr Med Chem 2004;11:2045-2081.
Candenas L, Lecci A, Pinto FM, Patak E, Maggi CA, Pennefather JN. Tachykinins and tachykinin receptors: effects in the genitourinary tract. Life Sci 2005;76:835- 862.
Candenas ML, Magraner J, Armesto CP, Anselmi E, Nieto PM, Martin JD, Advenier C, Pinto FM. Changes in the expression of tachykinin receptors in the rat uterus during the course of pregnancy. Biol Reprod 2001;65:538-543.
Candenas L. Pennefather JN, Kerr K, Pérez-Hernández N, Pinto FM. Tachykinins and Smooth muscle Function. In: New Frontiers in smooth muscle Biology and Physiology, Savineau J.P (ed.), Transworld Research Network Kerala, India, 2007, chapter 19, p. 384-409.
Cejudo Roman A, Pinto FM, Dorta I, Almeida TA, Hernández M, Illanes M, Tena-Sempere M, Candenas L. Analysis of the expression of neurokinin B, kisspeptin and their cognate receptors, NK3R and KISS1R in the human female genital tract. Fertil Steril 2012;97:1213-1219.
Magraner J, Morcillo E, Ausina P, Pinto FM, Martín JD, Moreau J, Anselmi E, Barrachina MD, Cortijo J, Advenier C, Candenas ML. Effects of Mn2+ on the responses induced by different spasmogens in the oestrogen-primed rat uterus. Eur J Pharmacol. 1997;326:211-222.
Magraner J, Pinto F, Anselmi E, Hernandez M, Perez-Afonso R, Martin, JD, Advenier C, Candenas L. Characterization of tachykinin receptors in the uterus of the oestrogen-primed rat. Br J Pharmacol 1998;123:259-268.
Maman E, Yung Y, Kedem A, Yerushalmi GM, Konopnicki S, Cohen B, Dor J, Hourvitz A. High expression of luteinizing hormone receptors messenger RNA by human cumulus granulosa cells is in correlation with decreased fertilization. Fertil Steril. 2012 Jan 17. [Epub ahead of print]
Patak E, Candenas ML, Pennefather JN, Ziccone S, Lilley A, Martín JD, Flores C, Mantecón AG, Story ME, Pinto FM. Tachykinins and tachykinin receptors in human uterus. Br J Pharmacol 2003;139:523-532.
Patak E, Pinto FM, Story ME, Pintado CO, Fleming A, Page NM, Pennefather JN, Candenas ML, Functional and Molecular Characterization of Tachykinins and Tachykinin Receptors in the Mouse Uterus. Biol Reprod 2005;72:1125-1133.
Pennefather JN, Lecci A, Candenas ML, Patak E, Pinto FM, Maggi CA. Tachykinins and tachykinin receptors: a growing family. Life Sci 2004a;74:1445-1463.
Pennefather JN, Patak E, Pinto FM, Candenas ML. Mammalian tachykinins and uterine smooth muscle: the challenge escalates. Eur J Pharmacol 2004b;500:15-26.
Pintado CO, Pinto FM, Pennefather JN, Hidalgo A, Baamonde A, Sanchez T, Candenas ML. A role for tachykinins in female mouse and rat reproductive function. Biol Reprod 2003;69:940-946.
Pinto FM, Almeida TA, Hernandez M, Devillier P, Advenier C, Candenas ML. mRNA expression of tachykinins and tachykinin receptors in different human tissues. Eur J Pharmacol 2004;494:233-239.
Pinto FM, Armesto CP, Magraner J, Trujillo M, Martin JD, Candenas ML. Tachykinin receptor and neutral endopeptidase gene expression in the rat uterus: characterization and regulation in response to ovarian steroid treatment. Endocrinology 1999;140:2526-2532.
Ravina CG, Seda M. Pinto FM, Orea A, Fernández-Sánchez M, Pintado CO, Candenas ML. A role for tachykinins in the regulation of human sperm motility. Human Reproduction 2007;22:1617-1625.